学生:陶xx刘xx杨xx内外蔗糖酶采用蛋白印迹技术处理实验Westernblot实验一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术01实验目的和意义Purposeandsignificance02国内外研究现状Researchstatus03实验的主要内容Experimentcontent04实验计划及安排Experimentplanarrangement目录CONTENTS实验目的和意义PurposeandsignificancePART.01研究目的研究目的作为分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其...
分子杂交与印迹技术EdwinSouthern印迹法将凝胶分离的DNA片段在胶中变性使其成为单链,再将单链DNA转移到硝酸纤维素膜上。通过探针与膜上DNA的杂交,检测特异性DNA的存在。DNA印迹实验①②③④⑤Southernblot印迹杂交技术的过程将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物上,即印迹;固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过。三种印迹技术的比较•RNA分子小,在转移前...
第一节分子杂交与印迹技术MolecularHybridizationandBlottingTechnique核酸分子杂交(nucleicacidhybridization)在DNA复性过程中,如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一起,只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系,就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex)。一、分子杂交与印迹技术的原理复性RNADNA(一)印迹技术利用各种物理方法使电泳胶中的生物大分子转移到NC等各种膜上,使之...
蛋白质印迹(Westernblot)试验方案溶液和试剂裂解缓冲液这些缓冲液可在4℃下保留数周,或者以分装形式在-20℃下保留长达1年。Nonidet-P40(NP40)缓冲液150mMNaCl1.0%NP40(可用0.1%TritonX-100替代)50mMTris-HClpH8.0蛋白酶克制剂RIPA缓冲液(放射免疫沉淀试验缓冲液)150mMNaCl1.0%NP-40或0.1%TritonX-1000.5%脱氧胆酸钠0.1%SDS(十二烷基硫酸钠)50mMTris-HClpH8.0蛋白酶克制剂Tris-HCl缓冲液20mMTris-HClpH7.5蛋白酶克制剂...
1/5试验1:抗ANA自身抗体的检测〔欧蒙斑点法〕一、试验目的及原理抗核抗体〔antinuclearantibody,ANA〕是一组针对细胞核成分的自身抗体。ANA阳性提示患有自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、混合性结缔组织病、枯燥综合症、全身性硬皮病、原发性胆汁性肝硬化等。依据细胞内各分子的理化特性和分布部位,ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体和抗其他细胞成分抗体。在本试验中,抗核...
小班美术版画教案能留下印迹的物品1、小班美术版画教案能留下印迹的物品幼儿园小班美术版画教案:能留下印迹的物品活动目标:1、通过查找、收集,了解阱曾生活中哪些物品能留下印迹。2、尝试用语言和动作与同伴沟通自己收集到的能留下印迹的物品。活动预备:1、“能留下印迹的物品”调查表人手一份,事先和家长一起填写好。2、与调查表有关的实物。活动过程:1、沟通各自的调查表。(l)和好朋友沟通。教师:你调查表上的印迹是用...
蛋白免疫印迹杂交〔WesternBlot〕技术手册A蛋白样本提取制备蛋白样品制备是WesternBlotting的第一步,更是打算WB成败的关键步骤,总体原则和留意事项:1:尽可能提取完全或降低样本简洁度只集中于提取目的蛋白〔通过承受不同提取方法或选择不同的试剂盒产品〕2:保持蛋白的处于溶解状态〔通过裂解液的PH盐浓度外表活性剂、复原剂等的选择〕3:提取过程防止蛋白降解、聚拢、沉淀、修饰等,〔低温操作,参与适宜的蛋白酶和磷酸酶...