影响脱分化和再分化的因子[共29页]

第四章影响植物细胞脱分化和再分化的因子董雯生物技术教研室植物离体培养中,影响植物细胞脱分化和再分化的因子有外因和内因两个方面。外因环境条件营养条件天然复合物有机物植物激素无机盐温度酸碱度渗透压光照湿度内因生理状态遗传性4.1培养基的影响4.1.1培养基的营养成分(四大类)无机盐混合物类有机物类植物激素类天然复合物类无机盐混合物类:提供植物细胞的无机营养,维持培养基的酸碱度和渗透压。(1)大量元素植物脱分化、再分化形态建成,需要量较大的的一类元素。包括N、P、K、S、Ca、Mg等。硝态氮和铵态氮的应用比例,可根据植物的类别灵活调用。(2)微量元素与植物代谢有密切关系。常用:Fe、Mn、Zn等。用量虽少,但是作用不小。有机物类:(1)碳水化合物:细胞碳源和能源,也调节培养基的渗透压。(2)维生素类(3)有机氮源:氨基酸和酰胺类,对细胞的脱分化、再分化器官建成都起重要作用。植物激素类1.常用激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素(1)生长素类在组织培养中,生长素主要被用于诱导愈伤组织形成,诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面,根对生长素最敏感。活性:2,4-D>NAA>IAA浓度范围:0.1-15mg/L(2)赤霉素主要用于刺激在培养中形成的不定胚发育成小植株,促进幼苗茎的伸长生长。此外,赤霉素和生长素协同作用,对形成层的分化有影响,当生长素/赤霉素比值高时有利于木质部分化,比值低时有利于韧皮部分化。此外,赤霉素还用于打破休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发。一般在器官形成后,添加赤霉素可促进器官或胚状体的生长。常用GA3(3)细胞分裂素类培养基中添加细胞分裂素有三个作用:①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长,细胞分裂素与生长素相互作用,当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时,诱导愈伤组织或器官分化出不定芽。②促进细胞分裂与扩大。③抑制根的分化。因此,细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖,而避免在生根培养时使用。活性:ZT>BA>KT浓度范围:0.1-10mg/L2.激素的应用规律:离体培养时,在生长素存在的条件下,细胞分裂素的作用有加强的趋势,不过两者在使用上有一定的顺序关系,由于处理的顺序不同,会影响培养物器官发生的方向。先生长素,后分裂素处理有利于细胞的分裂,但细胞不分化。先分裂素再生长素处理,细胞也分化。两者同时处理时,分化频率提高。但是两者同时处理时用量比值会改变形态建成的方向。总之自然界植物...

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