CLONTECH酵母双杂中文版[共54页]

目录(一)介绍4(二)试剂盒物品清单7(三)额外附加物品列表9(四)酵母菌株11(五)酵母载体14(六)方法简述:单杂交文库的构建和筛选16方法简述:双杂交文库的构建和筛选17(七)构建用于酵母单杂交的报告质粒载体18(八)构建用于酵母双杂交的DNA-BD融合载体19(九)构建生成cDNA文库21(十)构建和筛选酵母单杂交和双杂交文库(简述)27(十一)酵母单杂交文库的构建和筛选28(十二)酵母双杂交文库的构建和筛选30方法A:通过酵母配对(YeastMating)来筛选目的蛋白30方法B:通过共转化的方法筛选目的蛋白35(十三)分析阳性相互作用结果38(十四)问题解决指南44(十五)参考文献47(十六)相关产品50附录A:双链cDNA合成的典型结果51附录B:酵母感受态的制备—LiAc法52附录C:单杂交对照载体信息53附录D:双杂对照载体信息54表格列表TableI.BDMatchmaker酵母菌株的基因型11TableII.BDMatchmaker酵母菌株的表型11TableIII.单杂交系统的载体14TableIV.双杂交系统的载体15TableV.各BD-MatchmakerDNA-BD载体的比较19TableVI.RNA起始浓度和PCR扩增循环数之间的关系24TableVII.单杂交共转化的对照实验的设置29TableVIII.单杂共转化对照实验:期望的结果29TableIX.双杂交转化的对照实验的设置33TableX.双杂交配对筛选的对照实验的设置TableXI.双杂交共转化的对照实验的设置TableXII.双杂交共转化的对照实验:期望的结果TableXIII.用于PCR筛选菌落的AssemblingMasterMixs2图片列表Figure1.使用BDMatchmaker单杂交系统筛选蛋白-DNA相互作用4Figure2.使用BDMatchmaker单杂交系统筛选蛋白-蛋白相互作用4Figure3.酵母单杂交和双杂交筛选的大致步骤5Figure4.构建和筛选BDMatchmaker酵母单杂交和双杂交文库6Figure5.酵母菌株AH109和Y187中的报告基因12Figure6.BDMatchmaker酵母单杂交文库的构建和筛选16Figure7.BDMatchmaker酵母双杂交文库的构建和筛选17Figure8.用BDSMART技术合成高质量的dscDNA21Figure9.BDCHROMASPIN纯化柱和收集管26Figure10.通过酵母重整合作用来构建AD融合文库27Figure11.为双杂交筛选AD融合文库32Figure12.分析和证明可能的单杂交和双杂交相互作用阳性结果的策略39Figure13.通过酵母配对来验证蛋白-蛋白相互作用42Figure14.用对照用人胎盘PolyA+RNA合成双链cDNA51Figure15.p53HIS对照载体的图谱53Figure16.pGAD-Rec2-53AD对照载体的图谱53Figure17.pGADT7-RecTAD对照载体的图谱54Figure18.pGBKT7-53D...

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